【产品名称】

通用名称 ：骨切片

英文品名: bone slices

【预期用途】

本产品仅供科研使用 。

用于传统染色法和培养基ELISA（CrossLaps）骨破坏重吸收的体外精确检测

【产品简介】

骨是一种很有活力的组织 ，在人的一生中都在不断地重建 。现已证实 ，在骨中存在一些特殊物质 ，能够影响到破骨细胞的活性 。因此ng666南宫娱乐使用高质骨而不是牙质应用于研究 。现在将向ng666南宫娱乐的客户提供此类服务 。

每批骨切片通过重吸收检测法来测试其质量 。在该检测中 ，由骨切片上产生凹点证明破骨能力 。随后用培养基酶免吸附试剂盒Crosslaps检测上清液 。只有当两项测试都呈阳性时 ，该骨切片才能用于进一步的重吸收检测 。

破骨细胞产生凹点的活性通过人破骨重吸收方法检测 。对破骨重吸收的定量分析可以采用传统的对凹点染色方法 ，亦可使用培养基酶免吸附检测法Crosslaps 。

由于破骨细胞实验往往需要较大量的蛋白质 ，而从牛骨切片中提取的蛋白质用于96孔板 。

将人破骨细胞分散覆盖于牛骨皮质片上 ，然后加入不同浓度的抗重吸收剂（A: 90 μM, B: 30 μM, C: 10 μM, D: 0 μM） 。第6天取等量细胞培养上清液用于检测胶原c端交联肽（ctx）的量（培养基ELISA-CrossLaps）,从骨片上转移破骨细胞并且用阻凝蛋白苏木精染色 ，形成可见的凹点（图1） 。

ng666南宫娱乐正使用这种6孔板大骨片（GBS）来提取破骨细胞蛋白 ，这些破骨细胞在骨上而非塑料上培养 ，对蛋白质的表达是有影响的（数据未列出） 。要进行破骨细胞的基因描述实验时 ，ng666南宫娱乐推荐使用这些底物提取RNA 。从骨切片分离RNA的方案和人破骨细胞的培养方案可根据要求制定 。

【来源】

骨切片由牛股骨的皮质部分制成 ，完全适合96孔板 ，直径6mm ，大概200μm厚 。

【储存】

骨切片保存于4°C下70%乙醇中 。为了保持骨切片的质量 ，应缩短使用周期和避免室温下放置 。

【处理】

ng666南宫娱乐推荐在转移至96孔板之前 ，先将骨切片置于含培养基的10%血清中清洗三次 。

【培养】

重吸收实验一般持续72小时 。然而在加入试剂到破骨细胞培养液中16或24小时后 ，就可观察到细微的变化了 ，甚至8小时后即可用相应方法观察到 。

【特征】

与凹点染色和划线不同 ，培养基酶免吸附法Crosslaps不要求破骨细胞培养的终止 。因此 ，可以从相同的股切片中获得几个样品 ，从而使互换性检测特定物质影响下的破骨细胞活性成为可能 。材料的处置与常见细胞培养物的处置相同 。

【参考文献】

1.       HENRIKSEN ET AL. AM J PATHOL 164:1537-1545 (2004).

2.       HOLLBERG ET AL. EXP CELL RES 279:227-238 (2002).

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5.       SCHALLER ET AL. J BONE MINER RES 19:1144-1153 (2004)

6.       STROUP ET AL. J BONE MINER RES 16:1739-1746 (2001).